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口蹄疫O型液相阻斷試劑盒樣品收集、處理及保存方法

更新時間:2022-07-14   點擊次數:1911次
  口蹄疫O型液相阻斷試劑盒用于檢測牛、羊、豬血清中口蹄疫O型抗體,可用于口蹄疫O型疫苗免疫效果評價。
  試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被樣本抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的樣本呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
  口蹄疫O型液相阻斷試劑盒樣品收集、處理及保存方法
  1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
  2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
  3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
  4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
  5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  口蹄疫O型液相阻斷試劑盒操作注意事項
  1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。
  2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
  3. 濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,終結果乘以5才是樣本實際濃度。
  4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
  5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
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