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A型口蹄疫抗體檢測試劑盒注意事項和操作步驟

更新時間:2020-10-24   點擊次數:1802次
  A型口蹄疫抗體檢測試劑盒可用于檢測豬、牛、羊血清中的A型口蹄疫病毒抗體,用于評估A型口蹄疫苗免疫狀況。
  A型口蹄疫抗體檢測試劑盒用間接ELISA法,在酶標板條微孔上預包被純化的FMD病毒抗原。在試驗中,加入稀釋后的待檢血清,經過溫育后,若樣品中含有FMD病毒特異性抗體,則與包被板上的抗原結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后;再加入酶結合物,與檢測板上的抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶結合物;在微孔中加入TMB底物液,經酶催化形成藍色產物,加入終止液終止反應后,用酶標儀450nm波長測定反應孔中的吸光度A值。
  A型口蹄疫抗體檢測試劑盒注意事項:
  試劑盒使用前各試劑應平衡至室溫,應將試劑盒各組份放置室溫至少1小時以上。使用前應搖勻,使用后放回2-8℃。
  不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時應防止試劑污染。
  底物和終止液對皮膚和眼可能有刺激性,使用時應該注意防護。
  TMB(顯色液)不要暴露于強光和避免接觸氧化劑。
  檢測板拆封后應避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2-8℃)。
  所有廢棄物在丟棄之前應合理處理以免污染。
  嚴格遵守操作說明可以獲得很好的結果。操作過程中移液、定時和洗滌等的全部過程必須精確。
  血清稀釋板為一次性用品,不得重復使用;血清稀釋板的大容量為300μl/孔。
  A型口蹄疫抗體檢測試劑盒操作步驟:
  取預包被的檢測板(根據樣品多少,可拆開分次使用),將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。同時設陰性對照和陽性對照各2孔,取陰性及陽性對照各100μl分別加入反應孔中輕輕振勻孔中樣品(勿溢出)。
  蓋上封板膜(可按實際需要自行裁剪),置37℃溫育30分鐘。
  小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作濃度洗滌液每孔加250ul,后甩去孔內液體,以上步驟重復4-6次,后在干凈吸水紙上拍干。
  每孔加酶結合物100μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。
  小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌4-6次, 方法同3。切記后在干凈吸水紙上拍干。
  每孔加顯色液100?l,輕微震蕩混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘。
  每孔加終止液50μl,使反應終止,10分鐘內測定結果。
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